彩色馬蹄蓮的組織培養(yǎng)及工廠化生產(chǎn)
彩色馬蹄蓮的組織培養(yǎng)及工廠化生產(chǎn)
馬蹄蓮為天南星科馬蹄蓮屬多年生草本植物。地下具褐色肥大肉質(zhì)根莖,地上莖高可達(dá)lm或更高。葉基生,葉片劍形或戟形,先端銳尖,長(zhǎng)1 5?
成本核算
在進(jìn)行工廠化生產(chǎn)之前有一個(gè)至關(guān)重要的問(wèn)題就是成本核算。因?yàn)榻M織培養(yǎng)需要大量的人力、物力和財(cái)力,生產(chǎn)成本一般比常規(guī)方法高。一般可以用以下方法來(lái)降低成本:
1.充分發(fā)揮設(shè)備的生產(chǎn)潛力,提高組培苗的產(chǎn)量;
2.提高生根率到90%以上,移栽成活率在40%以上;
3.節(jié)約用電,降低能耗;
4.適當(dāng)提高增殖系數(shù)和繼代系數(shù);
5.抓住商機(jī),開(kāi)拓市場(chǎng)。
工廠化生產(chǎn)流程
組織培養(yǎng)的車(chē)間條件 馬蹄蓮組織培養(yǎng)的工廠化生產(chǎn)應(yīng)具備如下車(chē)間:洗滌車(chē)間、培養(yǎng)基配制分裝車(chē)間、消毒間、儲(chǔ)備室、按種車(chē)間和培養(yǎng)車(chē)間。要進(jìn)行周年生產(chǎn)還應(yīng)具有溫室和大棚。通過(guò)這些車(chē)間的共同工作可實(shí)現(xiàn)組培苗的流水線生產(chǎn)。目前已經(jīng)有經(jīng)改造過(guò)的培養(yǎng)基分裝設(shè)備,可實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)基的自動(dòng)分裝,而且成本不高,不但可以節(jié)省人力,還可以節(jié)省財(cái)力。接種車(chē)間應(yīng)配有緩沖間,要求有超凈工作臺(tái),使用前要先開(kāi)機(jī)10mirl,目的是用紫外線滅菌。培養(yǎng)車(chē)間要求可以控制光照時(shí)間和光照強(qiáng)度,最好既要有自然光照還要有補(bǔ)光設(shè)備。沒(méi)有特殊要求時(shí)用自然光可以節(jié)約電能降低成本。溫室和大棚是組培苗馴化和生長(zhǎng)成商品的地方,由于馬蹄蓮生長(zhǎng)適溫白天為
溫室或大棚中進(jìn)行滅菌 馬蹄蓮組織培養(yǎng)中污染率高一直是一個(gè)有待解決的難題,若要降低污染率,可將彩色馬蹄蓮的球莖用殺菌劑進(jìn)行處理,殺菌劑可用溫室常用的多菌靈50%可濕性粉劑。不同稀釋倍數(shù)的多菌靈處理時(shí)間不一樣,一般用2000倍液處理,不超過(guò)8小時(shí),成活率可達(dá)70%,具體方法是將外植體的塊莖浸泡在多菌靈中。此種方法操作簡(jiǎn)單、時(shí)間短、副作用小。還有一種方法是將彩色馬蹄蓮的母球洗凈后,用蛭石進(jìn)行無(wú)土栽培,根據(jù)季節(jié)條件在溫室或大棚內(nèi)培養(yǎng)一個(gè)月后,切取0.5一l cIll的生長(zhǎng)芽,用0.1%的NaCI()滅菌
培養(yǎng)基配制分裝車(chē)間進(jìn)行培養(yǎng)基的配制分裝 馬蹄蓮的組織培養(yǎng)中可用塊莖作外植體.初代培養(yǎng)時(shí).塊莖在培養(yǎng)基MS+6BA2.0mg?!?/SPAN>L一\土土0.5mg,。L中產(chǎn)生的叢生芽及愈傷組織最多、速度最快。
MS培養(yǎng)基的配方可參考具體方法如下:
(1)母液A、B、C、D的配制,按表1稱取藥品,將其溶解在蒸餾水中,定容至500ml。
(2)母液E的配制:將Nm?EDTA完全溶解后加FeS()n?7H z0溶解或?qū)?/SPAN>Na2一EDTA和FeSC)4?7H20分別溶解再相互溶合,定容為500ml,在遮光的褐色瓶?jī)?nèi),貯存在冷藏室內(nèi)。
(3)母液F制成高濃度液備用,貯存在冷藏室內(nèi)。
每種激素必須單獨(dú)配成母液,用時(shí)根據(jù)需要取用。另外,多數(shù)激素難溶于水,要先溶于可溶物質(zhì),然后才能加水定容。它們的配法如下:將IBA先溶于少量的95%的酒精中,再加水定容到一定濃度。
NAA可先溶于熱水或少量95%的酒精中,再加水定容到一定濃度。
6一BA先溶于少量1mol/L的HCl中再加水定容。
配制好的母液瓶上應(yīng)分別貼上標(biāo)簽,注明母液名稱、配制倍數(shù)、日期及配lL培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)取的量。
在生產(chǎn)實(shí)踐中,由于工廠化生產(chǎn)需要大量的培養(yǎng)基,因此可以根據(jù)以上配制原則,根據(jù)需要按比例和一定的濃度配制出大量的培養(yǎng)基,然后可用培養(yǎng)基分裝裝置,分裝在試管或錐形瓶里。
消毒車(chē)間內(nèi)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行消毒將封裝好的培養(yǎng)基放在專用的滅菌容器里,例如高壓鍋中進(jìn)行滅菌,在操作時(shí)首先要檢查一下是否放了足量的水,以免造成空燒或干鍋現(xiàn)象,然后將培養(yǎng)基保持直立狀態(tài),依次碼入鍋中,注意容器與容器不要靠得太近,這樣滅菌的效果更好。關(guān)閉鍋蓋加熱,使鍋內(nèi)壓力上升到0.
接種車(chē)間對(duì)彩色馬蹄蓮塊莖進(jìn)行接種 切取彩色馬蹄蓮的塊莖,接種在已消毒的培養(yǎng)基上,操作時(shí)要注意
以下幾點(diǎn):
(1)組織培養(yǎng)常用的接種工具和試劑有鑷子、剪刀、解剖刀、酒精燈、消毒劑、無(wú)菌水等。這些工具在使用前必須嚴(yán)格消毒。
(2)接種前,無(wú)菌室要用紫外燈或化學(xué)殺菌劑消毒,紫外燈照射要毛E30mirL以上。在進(jìn)行室內(nèi)消毒時(shí)要注意人身安全和過(guò)敏反應(yīng)。
(3)接種工作在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行,接種前超凈工作臺(tái)應(yīng)預(yù)先工作1 5min以上。操作人員應(yīng)在緩沖室內(nèi)換好經(jīng)過(guò)消毒的衛(wèi)生服,戴上口罩。接種時(shí)用酒精棉認(rèn)真擦洗臺(tái)面和手指(尤其是指縫和指甲),盛外植體的燒杯和培養(yǎng)皿也要用酒精消毒。
(4)經(jīng)過(guò)高壓滅菌的接種工具先用75%的酒精棉擦洗,再用酒精燈火焰灼燒,然后使其自然冷卻。
(5)接種時(shí)培養(yǎng)瓶瓶口要在酒精燈火焰附近,并在接種前后灼燒瓶口。夾取外植體時(shí)用力要適當(dāng)。用鑷子夾取外植體放入瓶?jī)?nèi)時(shí),不要碰瓶口。外植體和手指切勿碰到瓶口。
(6)接種過(guò)程中要將用過(guò)的鑷子、解剖刀經(jīng)常在酒精燈上灼燒滅菌;解剖臺(tái)也要經(jīng)常用燃燒的酒精棉球擦拭滅菌。接種過(guò)程中盡量不要說(shuō)話,以防止細(xì)菌夾帶在氣流中進(jìn)入培養(yǎng)容器。接種后要在酒精燈上灼燒瓶口和封口紙,并迅速封口。操作要規(guī)范、準(zhǔn)確、迅速。
接種后將材料送入培養(yǎng)車(chē)間進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)車(chē)間最重要的就是溫度因子和光照因子,因此不但要有控溫設(shè)備而且要有補(bǔ)光設(shè)備和自然光,這樣才能保證組培苗的質(zhì)量。彩色馬蹄蓮要求培養(yǎng)車(chē)間的條件是溫度27℃±
繼代培養(yǎng) 通過(guò)初級(jí)培養(yǎng)已產(chǎn)生愈傷組織,為使愈傷組織進(jìn)一步增殖需進(jìn)行增殖培養(yǎng),需調(diào)整培養(yǎng)基中激素的含量,經(jīng)大量的實(shí)踐證明,培養(yǎng)基:MS+6BA2.0mg/L+NAA0.:3rag/L是誘導(dǎo)愈傷組織分化出芽的最理想的培養(yǎng)基。經(jīng)此培養(yǎng)基的培養(yǎng),不定芽的增殖較多,芽垂直生長(zhǎng)雖然較慢,但葉色濃綠、植株粗壯。
生根培養(yǎng) 當(dāng)繼代生長(zhǎng)培養(yǎng)基中分化的幼苗高約2?
繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)時(shí)要更換培養(yǎng)基,因此要求培養(yǎng)基配制分裝車(chē)間協(xié)調(diào)好各培養(yǎng)基的生產(chǎn)。繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)也要在接種車(chē)間內(nèi)進(jìn)行,并且繼代和生根的組培苗要放在培養(yǎng)車(chē)間進(jìn)行培養(yǎng),因此在這幾個(gè)車(chē)間里可進(jìn)行分區(qū)管理。
利用溫室和大棚對(duì)彩色馬蹄蓮進(jìn)行馴化和移植培養(yǎng)出來(lái)的組培苗要想走出培養(yǎng)室,能在外界正常地生長(zhǎng),還必須經(jīng)過(guò)一個(gè)馴化階段,讓組培苗逐漸適應(yīng)外界的環(huán)境。馴化的具體方法是在培養(yǎng)車(chē)間內(nèi)打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,在室溫下煉苗l_2天,使之適應(yīng)外界的變溫環(huán)境。經(jīng)過(guò)煉苗處理后的試管苗即可進(jìn)行移植。移植前要充分考慮馬蹄蓮生長(zhǎng)習(xí)性。馬蹄蓮喜溫暖濕潤(rùn)的環(huán)境,不耐寒,怕日光暴曬。生長(zhǎng)適溫為:10月至翌年3月,需溫度
移植前還要對(duì)栽培基質(zhì)進(jìn)行滅菌。實(shí)踐證明,用蛭石作栽培基質(zhì)有利于幼苗的生長(zhǎng),幼苗生根最為旺盛??蓪⒂酌绨?/SPAN>
馴化時(shí)還要注意以下幾點(diǎn):
(1)溫度控制:馴化初期溫度應(yīng)接近培養(yǎng)室溫度,幾天后馴化溫度逐漸接近自然溫度;
(2)濕度控制:最初保持較高的相對(duì)濕度,然后逐漸降低空氣相對(duì)濕度,但由于彩色馬蹄蓮喜濕潤(rùn)環(huán)境,濕度要保持在80%一90%左右;
(3)光照控制:彩色馬蹄蓮忌陽(yáng)光直射,為保持水分平衡應(yīng)采取必要的遮光措施;
(4)防止雜菌侵染及病害:由于彩色馬蹄蓮喜濕潤(rùn)的環(huán)境,因此也有利于軟腐病等病害的發(fā)生。個(gè)別植株發(fā)病時(shí),應(yīng)及時(shí)拔除病株,并用2000倍液的福爾馬林對(duì)土壤消毒,噴灑波爾多液防止擴(kuò)散。發(fā)生蚜蟲(chóng)危害時(shí)可噴灑40~‘氧化樂(lè)果1 500?2000倍液防治,并注意改善通風(fēng)條件。
經(jīng)馴化后組培苗具有了一定的適應(yīng)能力可以直接用于切花和盆花生產(chǎn)。
切花生產(chǎn)
彩色馬蹄蓮的生產(chǎn)周期為6個(gè)月,因此可以利用組培苗和溫室大棚來(lái)實(shí)現(xiàn)彩色馬蹄蓮的周年生產(chǎn)。
栽植每床可栽3 4行,以品字形裁種較好,有利于株問(wèn)的通風(fēng)。栽植密度習(xí)品種高矮、生長(zhǎng)勢(shì)的旺盛程度及種球的大小而不同。以塑料大棚生產(chǎn)彩色馬蹄蓮,
塊莖大?。?) |
總面積10? |
凈面積10? | ||
大花型 |
小花型 |
大花型 |
小花型 | |
10-12 |
35 |
45 |
21 |
25 |
12-14 |
24 |
32 |
18 |
20 |
14-16 |
20 |
28 |
15 |
18 |
16-18 |
16 |
22 |
12 |
14 |
18-20 |
14 |
20 |
10 |
14 |
>20 |
12 |
18 |
9 |
12 |
栽培管理
(1)水:大白花栽培種(品種)喜充足水分,塊莖栽種后澆透水,以后生產(chǎn)地也要保持潮濕;溫室(大棚)栽培的,四周地面也應(yīng)經(jīng)常灑水,以提高環(huán)境的濕度,操作中要防止肥水灌入葉鞘中引起腐爛。而彩色馬蹄蓮則用水量不可過(guò)大,只在基質(zhì)或基部干燥時(shí)才澆透水,如果栽培基質(zhì)潮濕,澆水就應(yīng)適度;澆水的原則是次多、量少,在初期生長(zhǎng)階段,即在第一張葉片完全發(fā)育時(shí),可用滴灌法,每周澆水控制在幾次;以后,僅用少量水保持植株不受干燥;澆水時(shí)間以上午為好。國(guó)外生產(chǎn)中多用滴灌補(bǔ)充水分。
(2)溫度:溫室栽培中,土壤溫度保持
(3)光照:馬蹄蓮喜中一高度光照,以2。70001ux為宜,在春、秋季節(jié),適當(dāng)提高光的強(qiáng)度對(duì)花的質(zhì)量和產(chǎn)量都至關(guān)重要。在夏季可遮30%陽(yáng)光,防止土壤溫度升高及植株變矮。低光會(huì)使花苞褪色;短光照會(huì)降低植株高度,反之長(zhǎng)日照能增加植株的高度。
(4)營(yíng)養(yǎng):追肥可每月施用兩次200×10一a的低氮、高鉀的液肥;適量的施肥有利于降低歐文氏桿菌感染的危險(xiǎn)。
(5)疏葉處理:生長(zhǎng)開(kāi)花旺盛期,葉片繁茂達(dá)到擁擠程度時(shí),就應(yīng)及時(shí)疏葉。將外部枯老的葉子自基部剪除,保持株間通風(fēng)良好,促進(jìn)新花莖不斷抽生,可提高產(chǎn)花量。
采花 白色馬蹄蓮當(dāng)佛焰苞先端向下傾,色澤由綠轉(zhuǎn)白時(shí),為采收適期;彩色馬蹄蓮在佛焰苞著色良好,第一天開(kāi)始產(chǎn)生花粉時(shí),為適宜采收期。采收應(yīng)在每天最涼爽時(shí)進(jìn)行,植株不能潮濕,但植株體內(nèi)應(yīng)含有充足的水分。為此,收花期應(yīng)每3?4天澆水一次。采收方式是將莖直接從塊莖中拔出,若從基部剪斷,則會(huì)影響下一朵花的抽出。拔出后隨即放在盛有清水(內(nèi)有含氯藥片)的桶中,并置于
盆花生產(chǎn)
上盆 即將培養(yǎng)出來(lái)的幼苗栽植在花盆中。上盆時(shí)要在盆底放入碎瓦片等排水物,上面再填一層培養(yǎng)土,以待栽苗。栽植完畢后,充分澆水,放在遮蔭處緩苗數(shù)日。
換盆 隨著馬蹄蓮的生長(zhǎng),需要從小盆換到大盆。應(yīng)按植株發(fā)育的大小逐漸換到大盆,如果一下?lián)Q到較大的盆,會(huì)影響根系的生長(zhǎng)和水分的調(diào)節(jié)。
倒盆及松盆土 經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的生長(zhǎng),馬蹄蓮的株幅逐漸增加,造成株問(wèn)擁擠,這就需要加大盆間的距離,以改善通氣和透光條件,也可以使馬蹄蓮的生長(zhǎng)均勻一致。如果在澆水后盆土出現(xiàn)板結(jié)的現(xiàn)象,就需要松盆土,使空氣流通,植株生長(zhǎng)良好。同時(shí)可以除去土面的青苔和雜草。
施肥栽植前要施足基肥?;室猿浞指斓娘灧省⒇i廄肥為好。除栽植前施基肥外,從5月份每10一15天追施一次液肥?;ㄆ谕V棺贩屎蛧娝?。肥料可用腐熟的餅肥水,生長(zhǎng)旺季可每隔10天左右增施一次氮鉀混合的稀薄液肥。施肥時(shí)切忌將肥水澆入葉鞘內(nèi),以免引起腐爛。
澆水 彩色馬蹄蓮喜歡濕潤(rùn)環(huán)境,因土壤需保持較高的含水量,所以生長(zhǎng)期需經(jīng)常澆水,并且早、晚用水噴灑花盆周?chē)孛?,以增加濕度,最?/SPAN>5?7天用海綿沾水揩抹葉面,以保持葉片新鮮清潔。
光照管理 幼苗時(shí),在有散射光處養(yǎng)護(hù),注意不要直接日曬,也不可全部蔽蔭。花期需要充足的光線,光線不足佛焰苞常變成黃綠色,降低觀賞價(jià)值。但在夏季要遮去強(qiáng)烈的直射光。
盆花的周年生產(chǎn)馬蹄蓮于12月份開(kāi)始開(kāi)花,2?4月為開(kāi)花盛期,花期可延續(xù)到5月份。5月至7月,進(jìn)入休眠期,應(yīng)少澆水,可將盆移到室外,并盡量為其創(chuàng)造一個(gè)較為干燥的環(huán)境,使盆側(cè)放,免積雨水,以防腐爛。待葉片全部枯黃后,取出塊莖,置于通風(fēng)陰涼處貯藏,待秋季栽植前將大小塊莖分級(jí)分別栽植,大球開(kāi)花,小球養(yǎng)苗,如果不讓馬蹄蓮休眠,可干6月下旬將其放置到完全遮蔭且通風(fēng)極好的地方養(yǎng)護(hù)。每天中午、下午都要向地面噴水2?3次,以降低溫度,在白天氣溫不超過(guò)
馬蹄蓮的工廠化生產(chǎn)是一個(gè)很復(fù)雜的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程包括很多環(huán)節(jié),每一個(gè)環(huán)節(jié)都需要大量的人力、物力以及財(cái)力。因此在進(jìn)行工廠化生產(chǎn)時(shí),要充分考慮可能遇到的每一個(gè)問(wèn)題。只有在組織培養(yǎng)時(shí)科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),生產(chǎn)時(shí)高效高質(zhì),銷售時(shí)緊抓商機(jī),才能充分發(fā)揮組織培養(yǎng)在規(guī)模生產(chǎn)上的優(yōu)勢(shì),才能取得更大的效益。
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